核酸増幅法、核酸基板、核酸分析方法及び核酸分析装置

Nucleic acid amplification method, nucleic acid substrate, nucleic acid analysis method, and nucleic acid analysis device

Procédé d'amplification d'acide nucléique, substrat pour acide nucléique, procédé et dispositif d'analyse d'acide nucléique

Abstract

本発明は、シーケンサによる配列解析の対象となる増幅核酸断片の束(クラスタ)を高いクラスタ密度で作製し、かつ、クラスタ内の核酸断片数を10,000分子以上とすることで、核酸配列解析のスループットを高め、かつ、読取り精度を高めるための核酸増幅手法に関し、基体上にプライマDNAをパターン状に形成しておき、そこに、試料DNAから合成した嵩高い鋳型DNAを固定して増幅反応を行うことで、高クラスタ密度とクラスタ内の増幅断片数を高めることを実現する。
Cette invention concerne une technique d'amplification d'acide nucléique qui permet d'augmenter le rendement de l'analyse d'une séquence d'acide nucléique et d'augmenter la précision de lecture par production d'un faisceau (agrégat) de fragments d'acide nucléique d'amplification dont les séquences doivent être analysées à l'aide d'un séquenceur à une densité d'agrégats élevée et qui permet de fixer le nombre de fragments d'acide nucléique à 10 000 molécules ou plus. Dans la technique selon l'invention, l'ADN de l'amorce est formé selon un motif sur une base, l'ADN de matrice très volumineux qui est synthétisé à partir de l'ADN d'essai est immobilisé sur la base, et la réaction d'amplification est ensuite mise en œuvre. Ainsi, une densité d'agrégats élevée et une augmentation du nombre de fragments d'amplification dans l'agrégat peuvent à la fois être obtenues.
The present invention relates to a nucleic acid amplification technique for increasing the through-put of a nucleic acid sequence analysis and increasing read-out accuracy by producing a bundle (cluster) of amplification nucleic acid fragments of to be analyzed on the sequences thereof by mans of a sequencer at a high cluster density and setting the number of the nucleic acid fragments in the cluster at 10,000 molecules or more. In the technique, primer DNA is formed in a patterned form on a base, highly bulky template DNA that is synthesized from sample DNA is immobilized on the base, and an amplification reaction is then carried out. In this manner, both a high cluster density and the increase in the number of the amplification fragments in the cluster can be achieved.

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Patent Citations (3)

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